Postavy
Jan Mydlář - student medicíny, který se pro lásku k Dorotce vzdal studia a dal se na dráhu kata, popravil 27 českých pánů, později sám obětoval život pro lásku své dcery
Jan Jessenius st. - student medicíny, později uznávaný lékař, nejlepší přítel Jana Mydláře, vykonal první veřejnou pitvu, s dalšími 26 českými stavy byl popraven. Měl syna Jana
Vypravěč/Eduard Kelly - provází dějem od studií Jana Mydláře až po jeho smrt; vědec, snaží se vytvořit elixír mládí, tišící nápojem pomohl zmírnit smrt Dorotky i Jana Jessenia
Žofie Pešanová - hospodyně Adama Vaňury, žena která jeho sňatkem s Dorotkou přišla o všechno, rozhodla se zbavit jak Vaňury, kterého otrávila, tak i Dorotky, na kterou svalila vinu, všech svých skutků lituje, avšak chamtivost jí omezuje
Dorotka - jediná láska Jana Mydláře, kvůli nedostatku peněz na přání otce vstoupila do manželství s Adamem Vaňurou, který ji vše odkázal, poté, co na ni Žofie svalila vinu za Vaňurovu smrt, byla odsouzena k upálení, po porodu dcery Mandalénky musela její láska (Jan Mydlář) vykonat popravu, po smrti se Mydlářovi ve snech zjevuje a vede ho životem
Adam Vaňura - mlynář, zaměstnavatel Žofie, které původně věnoval vše, ale po sňatku s chudou Dorotkou závěť přepsal, Žofie jej otrávila a smrt svalila na Dorotku
Ferdinand Vaňura - chrudimský purkmistr, později šéf pražské bezpečnosti a manžel Žofie, nad bratrovou rakví přísahal pomstu vrahovi, nechal odsoudit Dorotku a později sám zavraždil svou ženu
Mandalénka - dcera Dorotky a Jana Mydláře, je zamilovaná do Jana Jessenia ml., ale stydí se za svůj původ, byla vychována Bětuškou, kterou má ráda, ač není její biologickou matkou
Jan Jessenius ml. - syn Jana Jessenia, miluje Mandalénku, ale je pro něj těžké přenést se přes to, že jeho otec má být popraven jejím otcem, na příkaz F. Vaňury je zatčen a odsouzen k popravě, není popraven, protože se za něj vydá sám Jan Mydlář
Bětuška - nešťastná manželka Jana Mydláře, kterou vlastně nikdy nemiloval, vzal si ji jen aby vychovala Mandalénku, kterou sama miluje jako vlastní, neunese tíhu toho, že je nemilovaná a navíc, že její manžel se stane „vrahem českého národa“ a sama si bere život.
Lea - jediná zná pravdu o vrahu Adama Vaňury, protože viděla Žofii, jak vlévá do vína jed, to ona odnesla Mandalénku od Žofie a předala ji Mydlářovi
Soudce - odsoudil Dorotku k smrti upálením
Pacholek Václav - stává se nástupcem Jana Mydláře a zároveň jeho katem